Guanidina tiocianat 丨 CAS 593-84-0

La guanidina tiocianat 丨 CAS 593-84-0 (GTC) és un agent caotròpic potent àmpliament utilitzat en biologia molecular, bioquímica i laboratoris clínics. Té un paper crític en l’extracció d’àcids nucleics i la desnaturalització de proteïnes. A continuació es mostren les seves aplicacions i avantatges principals:

1. Extracció d’àcid nucleic:

- Aïllament de l’ARN i l’ADN: GTC s’utilitza en els tampons de lisi per aïllar l’ARN i l’ADN de cèl·lules i teixits. Ajuda a interrompre les cèl·lules, desnaturalitzar proteïnes i inactivar nucleases (enzims que podrien degradar l’ARN o l’ADN).

- Extracció d’ARN viral: s’utilitza habitualment en l’extracció d’ARN viral, que és crucial per a proves de diagnòstic, com ara RT-PCR per detectar infeccions virals, inclòs Covid -19.

2. Desnaturalització de proteïnes:

- Estudis de proteïnes: el tiocianat de guanidina 丨 CAS 593-84-0 s'utilitza per desnatar proteïnes, desplegant -les en les seves formes lineals. Això és útil per estudiar estructures i funcions de proteïnes.

-SDS-PAGE: GTC s’utilitza en la preparació de mostres per a l’electroforesi en gel de sulfat de sulfat de sodi (SDS-PAGE) per assegurar que les proteïnes estiguin completament desnaturades i linealitzades per a una separació de mida precisa.

3. Assajos d’hibridació:

- Blot de nord i sud: el GTC es pot utilitzar en tampons d’hibridació per millorar la sensibilitat del nord i del sud de la tamany mantenint els àcids nucleics en un estat desnaturalitzat.

4. Lisi i purificació cel·lular:

- Reactiu de lisi cel·lular: GTC és un component dels reactius de lisi cel·lular utilitzats en els àcids nucleics purificadors o proteïnes de diverses mostres biològiques.

- Estabilització de l'ARN: estabilitza l'ARN inactivant els RNases durant els procediments d'extracció.

5. Inactivació de patògens:

- Seguretat en diagnòstic: GTC és eficaç per inactivar virus, bacteris i altres patògens, cosa que el fa útil en la manipulació de mostres infeccioses, particularment durant l’extracció d’ARN.

1. Lisi cel·lular efectiva:

- GTC descompon de manera eficient les membranes cel·lulars i les proteïnes desnatures, permetent l'extracció ràpida i exhaustiva d'àcids nucleics.

2. Inhibició de la nucleasa:

- La guanidina tiocianat 丨 CAS 593-84-0 inactiva efectivament RNases i DNases, evitant la degradació dels àcids nucleics durant els processos d'extracció, cosa que és fonamental per obtenir ARN i ADN de gran qualitat.

3. Compatibilitat amb diversos mètodes d’extracció:

-GTC és compatible amb diversos mètodes d’extracció d’àcids nucleics, incloent la purificació de columnes basades en sílice, l’extracció de fenol-cloroform i els mètodes basats en perles magnètiques.

4. Alt rendiment i puresa:

- L’ús de GTC en protocols d’extracció d’àcid nucleic sovint produeix rendiments elevats d’ARN pur i ADN, essencials per a aplicacions aigües avall com PCR, QPCR i seqüenciació.

5. Inactivació de patògens:

- La seva capacitat per inactivar els patògens fa que sigui una elecció segura per manejar mostres potencialment infeccioses, reduint el risc de contaminació i garantint la seguretat al laboratori.

6. Sensibilitat millorada en els assajos d’hibridació:

- GTC millora la sensibilitat dels assajos d’hibridació, donant lloc a una detecció més precisa d’àcids nucleics en diverses aplicacions, incloent l’anàlisi de l’expressió gènica i les proves diagnòstiques.

Precaucions:

- Toxicitat: el GTC és altament tòxic i pot ser perjudicial si s’inhala, ingereix o entra en contacte amb la pell. S'ha de gestionar amb cura, mitjançant equips de protecció adequats.

- Corrosiu: el GTC és corrosiu i pot causar danys a materials com metalls i determinats plàstics, així com cremades greus a la pell i als ulls.

- Passat ambiental: s’hauria d’eliminar correctament, ja que pot ser perjudicial per a l’entorn si no es gestiona correctament.

La guanidina tiocianat 丨 CAS 593-84-0 és un reactiu potent i versàtil, particularment en el camp de la biologia molecular, on facilita l'extracció d'àcids nucleics d'alta qualitat i inactiva possibles contaminants.